Xét nghiệm nhanh Adenovirus-Tiết dịch mũi

Mục đích sử dụng:

SARS-CoV -2 Bộ xét nghiệm Axit nucleic được áp dụng để phát hiện định tính axit nucleic của COVID -19 trong gạc mũi họng, gạc hầu họng và đờm. Kết quả xét nghiệm cung cấp cơ sở chẩn đoán phân tử cho bệnh nhân nhiễm trùng hoặc nghi ngờ, và không nên được sử dụng làm tiêu chí duy nhất để chẩn đoán lâm sàng.

Vật liệu:

Quy trình kiểm tra:

A. Chuẩn bị mẫu

RNA được chiết xuất là nguyên liệu ban đầu cho bộ xét nghiệm Axit Nucleic SARS-CoV -2.

Quan trọng: Mỗi quy trình chiết xuất axit nucleic phải được thực hiện đồng thời với một đối chứng Dương tính (40 μL, pha loãng với dung dịch muối vô trùng / PBS đến thể tích mong muốn) và một đối chứng âm (40 μL, pha loãng với dung dịch muối vô trùng / PBS đến thể tích mong muốn).

Khuyến nghị sử dụng các bộ dụng cụ chiết xuất axit nucleic thương mại sau: PureLinkTM Viral RNA / DNA Mini Kit (Invitrogen); Bộ virut RNA Mini (QIAGEN); TIANamp Hi-DNA / RNA Kit (TIANGEN);

B. Thiết lập hỗn hợp phản ứng

1. Tất cả thuốc thử và mẫu phải được rã đông hoàn toàn, trộn hoàn toàn và ly tâm trong thời gian ngắn ở nhiệt độ phòng (khoảng 18 đến 25 độ) trước khi sử dụng.

2. Chuẩn bị thể tích yêu cầu của Hỗn hợp phản ứng trong một ống li tâm siêu nhỏ bằng polypropylene có kích thước thích hợp.

3. Dùng pipet lấy 25 µL Hỗn hợp phản ứng cho vào mỗi giếng cần thiết của đĩa phản ứng quang học 96- thích hợp hoặc ống phản ứng quang học thích hợp.

C. Bổ sung mẫu

1. Thêm 5 μL RNA chiết xuất từ ​​Mẫu / Đối chứng dương tính / Đối chứng âm tính. Tổng thể tích là 30 μL.

2. Trộn kỹ các mẫu và mẫu chứng với Hỗn hợp phản ứng bằng cách dùng pipet lên và xuống / Vortex.

3. Đậy đĩa phản ứng của giếng 96- bằng các nắp đậy thích hợp hoặc màng keo quang học và các ống phản ứng có nắp đậy thích hợp.

4. Ly tâm tấm phản ứng giếng 96- trong máy ly tâm có rôto tấm microtiter trong 30 giây ở khoảng 2500 vòng / phút.

D. Lập trình công cụ PCR thời gian thực

Để biết thông tin cơ bản về việc thiết lập và lập trình các thiết bị PCR thời gian thực khác nhau, vui lòng tham khảo hướng dẫn sử dụng của thiết bị tương ứng. Quá trình chạy PCR được thực hiện với các điều kiện đạp xe như mô tả trong bảng dưới đây.

Xác định bộ phát hiện huỳnh quang

* Vui lòng đặt tham chiếu bên trong huỳnh quang của thiết bị thành "Không có", ví dụ: Đối với thiết bị dòng ABI, đặt "Tham chiếu thụ động" thành "Không có".

E. Phân tích dữ liệu

Vui lòng thiết lập các thông số phân tích và phân tích dữ liệu theo hướng dẫn vận hành của các thiết bị liên quan.

Lấy ABI 7500 làm ví dụ:

Đường cơ bản phải được đặt thành một phạm vi loại bỏ huỳnh quang nền được tìm thấy trong các chu kỳ đầu của quá trình khuếch đại, nhưng không chồng lên khu vực nơi tín hiệu khuếch đại tăng lên trên nền (Giá trị bắt đầu: 3 ~ 10; Giá trị kết thúc: {{2} }). Ngưỡng chu kỳ (Ct) phải ở cơ sở của pha hàm mũ. Nhấp vào "Phân tích" để nhận kết quả phân tích tự động và đọc kết quả phát hiện trong cửa sổ "Báo cáo".

Chú phổ biến: adenovirus xét nghiệm nhanh dịch tiết mũi, Trung Quốc, nhà cung cấp, nhà sản xuất, nhà máy, số lượng lớn